ELISA試劑盒步驟及原理
ELISA試劑盒步驟及原理
基本原理：本試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗Mouse ENA-78抗體包被于酶標(biāo)板上，實驗時標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的ENA-78會與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入化的抗Mouse ENA-78抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗Mouse ENA-78抗體與結(jié)合在包被抗體上的Mouse ENA-78結(jié)合、與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入發(fā)光底物混合液，發(fā)光底物在辣根過氧化物酶的催化下發(fā)出熒光，用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測定化學(xué)發(fā)光值（CL），ENA-78濃度與化學(xué)發(fā)光值之間呈正相關(guān)，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中ENA-78的濃度。
操作步驟：
1、在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各 100μL，37℃孵育90分鐘
2、倒去孔內(nèi)液體，拍干，加入 100μL 化抗體工作液，37℃孵育 60 分鐘
3、洗滌 3 次
4、加入 100μL 酶結(jié)合物工作液， 37℃孵育 30 分鐘
5、洗滌 5 次
6、加入 100μL 底物溶液， 37℃孵育 5 分鐘左右
7、讀數(shù)
基本原理：本試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗Mouse ENA-78抗體包被于酶標(biāo)板上，實驗時標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的ENA-78會與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入化的抗Mouse ENA-78抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗Mouse ENA-78抗體與結(jié)合在包被抗體上的Mouse ENA-78結(jié)合、與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入發(fā)光底物混合液，發(fā)光底物在辣根過氧化物酶的催化下發(fā)出熒光，用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測定化學(xué)發(fā)光值（CL），ENA-78濃度與化學(xué)發(fā)光值之間呈正相關(guān)，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中ENA-78的濃度。
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